Investigation in vivo of Enterococcus faecalis in endodontic retreatment by phenotypic and genotypic methods / Investigação in vivo de Enterococcus faecalis em retratamento endodôntico por meio de métodos fenotípicos e genotípicos

This study aimed to investigate the prevalence of E. faecalis in root-filled canals using culture and molecular approaches. It was evaluated the antimicrobial susceptibility to different antibiotics and the virulence factors of E. faecalis isolates. Microbial samples were taken from thirty root-filled canals. Culture methods and 16S rDNA assay were used to identify E. faecalis. The antimicrobial susceptibility of E. faecalis was determined by MIC values using the E test. Cultivable strains of E. faecalis were investigated for virulence factors by PCR technique. E. faecalis were detected by culture (7/30), traditional PCR assay (13/30) and nested PCR (23/30). Both PCR were significantly more effective than culture in detecting E. faecalis (p < 0.05). All tested E. faecalis were highly sensitive to amoxicillin. Some strains of E. faecalis were resistant to antibiotics such as rifampicin (4/12), erythromycin (3/12) and azythromycin (8/12). The genes efaA and ace were detected in all isolates. The other virulence genes were found in 91.6 (gelE), 83.3 (asa), 25 (esp) and 16.6% (cylA). Strains of E. faecalis isolated from root-filled canals showed virulence factors related to adherence. They also showed resistance to some antibiotics commonly used in dentistry.

O objetivo deste estudo foi investigar a prevalência de E. faecalis em dentes tratados endodonticamente utilizando as técnicas de cultura e molecular. Foram avaliados a suscetibilidade antimicrobiana frente a diferentes antibióticos e os fatores de virulência de E. faecalis isolados. As amostras foram coletadas de 30 dentes tratados endodonticamente. Métodos de cultura e 16S rDNA foram utilizados para identificar E. faecalis. A suscetibilidade antimicrobiana de E. faecalis foi determinada por valores de MIC, utilizando o E test. Os fatores de virulência de cepas de E. faecalis cultiváveis foram investigados pela técnica de PCR. E. faecalis foram detectados por cultura (7/30), PCR tradicional (13/30) e nested PCR (23/30). Ambas as técnicas de PCR foram significativamente mais eficazes do que a cultura na detecção de E. faecalis (p < 0,05). Todos os E. faecalis testados foram altamente sensíveis à amoxicilina. Algumas cepas de E. faecalis foram resistentes a antibióticos, como a rifampicina (4/12), eritromicina (3/12) e azitromicina (8/12). Os fatores de virulência efaA e ace foram detectados em todos os isolados. Os outros genes de virulência foram encontrados em 91,6 (gelE), 83,3 (asa), 25 (esp) e 16,6% (cylA). As cepas de E. faecalis isoladas em dentes tratados endodonticamente mostraram fatores de virulência relacionados à adesão. Eles também apresentaram resistência a alguns antibióticos comumente utilizados na odontologia.

Culture and molecular detection of Enterococcus faecalis from patients with failure endodontic treatment and antimicrobial susceptibility of clinical isolates / Cultura e detecção molecular de Enterococcus faecalis de pacientes com insucesso no tratamento endodôntico e suscetibilidade antimicrobiana dos isolados clínicos

Objective: The aim of this study was to evaluate the minimal inhibitory concentrations (MIC) of different antibiotic agents against to the most prevalent microorganism found in root-filled canals by culture and molecular approaches. Material and Methods: The microbial samples were taken either from thirty root-filled canals after removal of gutta-percha. Culture methods and 16s rDNA assay were used to identify the E faecails present in the samples. The antimicrobial susceptibilities of the isolates of E faecalis were determined by MIC values using the E test System and interpreted according to the Clinical and Laboratory Standards Institute guidelines. The following antibiotics were used: benzylpenicillin, amoxicillin, amoxicillin-clavulanic acid, erythromycin, azithromycin, vancomycin, chloramphenicol, tetracycline, doxycycline, ciprofloxacin, rifampicin and moxifloxacin. Results: E faecalis were isolated (7/30) and detected (13/30) by culture and PCR assay, respectively. All tested E faecalis (n = 12) were highly sensitive to amoxicillin, moxifloxacin, vancomycin, benzylpenicillin and amoxicillin-clavulanic acid. Isolated E faecalis strains were resistant to some antibiotics such as rifampicin (4/12), tetracycline (2/12), doxycycline (1/12), erythromycin (3/12) and azythromycin (8/12). Conclusion: Amoxicillin, amoxicillin-clavulanic acid, benzylpenicillin, vancomycin and moxifloxacin were the most active antibiotics, in vitro, against E faecalis clinical strains, with all the isolates being susceptible Azithromycin and erythromycin were least effective, with none percentage of isolates being susceptible, during laboratory testing. Moreover, E faecalis were identified more frequently by PCR assay than by culture technique.

Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar as concentrações inibitórias mínimas (CIM) de diferentes antibióticos contra micro-organismos mais prevalentes em canais radiculares pelos métodos moleculares e de cultura. Material e Métodos: As amostras microbianas foram obtidas de trinta canais radiculares após a remoção da gutapercha. Os métodos de cultura e ensaio 16s rDNA foram utilizados para identificar E. faecalis presente nas amostras. As susceptibilidades antimicrobianas dos isolados de E. faecalis foram determinadas pelos valores de CIM utilizando o sistema E teste e interpretados de acordo com as diretrizes CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute). Foram utilizados os seguintes antibióticos: benzilpenicilina, amoxicilina, amoxicilina com ácido clavulânico, eritromicina, azitromicina, vancomicina, cloranfenicol, tetraciclina, doxiciclina, ciprofloxacina, moxifloxacina e rifampicina. Resultados: E. faecalis foram isolados (7/30) e detectados (13/30) por cultura e pelo método PCR, respectivamente. Todos E. faecalis (n = 12) foram altamente sensíveis à amoxicilina,moxifloxacina,vancomicina, benzilpenicilina e amoxicilina com ácido clavulânico. Cepas isoladas de E. faecalis foram resistentes a alguns antibióticos como a rifampicina (4/12), tetraciclina (2/12), doxiciclina (1/12), eritromicina (3/12) e azitromicina (8/12). Conclusão: Amoxicilina, amoxicilina com ácido clavulânico, benzilpenicilina, vancomicina e moxifloxacina foram os antibióticos mais ativos, in vitro, contra cepas clínicas de E. faecalis, com todos os isolados sendo suscetíveis. Azitromicina e eritromicina foram menos eficazes, com nenhuma porcentagem de isolados suscetível durante os testes laboratoriais. E ainda, E. faecalis foram identificados mais frequentemente pela técnica PCR do que pela técnica de cultura.

Relationship between oral health and psychological factors in institutionalized and non-institutionalized elderly individuals / Relação entre saúde bucal e fatores psicológicos em idosos institucionalizados e não institucionalizados

Objective: To compare the oral health status between institutionalized and non-institutionalized elderly individuals living in Maringá, PR, Brazil and toanalyze how clinical and psychologic variables are correlated. Methods: In this study, 86 elderly persons from Maringá were analyzed, of whom 38 were institutionalized and 48 non-institutionalized. Subjective oral health conditions based on General Health Assessment Index (GOHAI) were analyzed. Geriatric Depression Scale (GDS-15) and Perceived Stress Scale (PSS) were used to evaluate psychological conditions and stress self-perception, respectively, of all individuals. The dental status of subjects was evaluated using the decayed, missing, and filled teeth index (DMFT), considering their use of or need for removable dental prostheses. The salivary flow and salivary cortisol levels were measured. Results: Institutionalized subjects had more symptoms of depression, lower salivary flow and a larger number of missing and decayed teeth whencompared with non-institutionalized individuals, who presented a larger number of filled teeth. Use of and need for prosthesis were moreprevalent in the institutionalized group. Correlation was found between salivary flow and need for prosthesis, and between salivary flow andmissing teeth. No significant statistical difference was found among GOHAI, PSS and salivary cortisol levels. Conclusion: The fact that institutionalized elderly assessed have a more precarious oral health status than that of the non-institutionalized is associated with clinical, social, and psychological aspects. Effective dental and psychological interventions are needed to improve the quality of oral health of the institutionalized elderly living in Maringá.

Objetivo: Comparar as condições de saúde bucal entre idosos institucionalizados e não institucionalizados da cidade de Maringá e analisar como as variáveis clínicas e/ou psicológicas se correlacionam.Métodos: Participaram desta pesquisa 86 idosos da cidade de Maringá, 38 institucionalizados e 48 não institucionalizados. Foram avaliadas as condições subjetivas de saúde bucal por meio do índice General Oral Health Assessment Index (GOHAI). A condição psicológica foi avaliada pela Escala de Depressão Geriátrica (GDS-15) e a autopercepção de situações estressantes, pela Escala de Estresse Percebido (PSS). Para avaliação clínica da saúde bucal foi analisada a condição dos dentes por meio do índice de dentes cariados, perdidos, obturados (CPO-D) e o uso enecessidade de próteses removíveis. Foram também analisados o fluxo salivar e a concentração de cortisol salivar. Resultados: O grupo institucionalizado apresentou mais sintomas depressivos, menor fluxo salivar, maior número de dentes perdidos e cariados, e maior frequência de uso e necessidade de próteses dentárias em comparação com o não institucionalizado. Idosos não institucionalizados apresentaram maior quantidade de dentes restaurados. Foi observada correlação negativa entre fluxo salivar e necessidade de próteses e também entre fluxo salivar e dentes cariados. O índice GOHAI, PSS e níveis de cortisol salivar não diferiram entre os grupos. Conclusão: A precária condição de saúde oral do idoso institucionalizado em relação ao não institucionalizado está associada com aspectos clínicos, sociais e psicológicos. Nesse sentido, efetivas intervenções odontológicas e psicológicas são necessárias para melhorar a qualidade da saúde oral dos idosos institucionalizados na cidade de Maringá.